Poly A သယ်ဆောင်သူ RNA

ကြောင်နံပါတ် HC4001A

Poly A၊ polyadenylate သည် 100 ~ 10000 polyadenylates ၏ ရောစပ်မှုဖြစ်ပြီး၊ ၎င်းသည် polynucleotide phosphorylase in vitro in vitro ဖြင့် ပိုလီမာပြုလုပ်ထားသည်။vivo တွင်၊ poly (a) ကို mRNA ၏တည်ငြိမ်မှုကိုတိုးတက်စေရန်အင်ဇိုင်းဖြင့် mRNA ၏ 3-terminal သို့ပေါင်းထည့်သည်။နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူမှုတွင် poly A ကို lysate သို့မဟုတ် binding solution တွင် ပေါင်းထည့်ခြင်းသည် DNA နှင့် RNA ၏ အထွက်နှုန်းကို တိုးတက်စေနိုင်သည်။ယန္တရားpoly A ၏ nucleic acid ၏အထွက်နှုန်းကိုတိုးတက်စေသောအချက်မှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။

1. ဆောင်းပါးများ၏ မျက်နှာပြင် စုပ်ယူမှုနှင့် ပြည့်နှက်သော ထိတွေ့မှု။polypropylene ဆောင်းပါးအများစုသည် မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် တည်ငြိမ်သောလျှပ်စစ်ဓာတ်များရှိပြီး နျူကလိယအက်ဆစ်များကို စုပ်ယူနိုင်မည်ဖြစ်သည်။Carrier RNA သည် ဤအရာများကို ပြည့်ဝစေနိုင်သည်။စုပ်ယူမှုအကျိုးသက်ရောက်မှုနှင့်ပစ်မှတ် nucleic acids ဆုံးရှုံးမှုကိုလျှော့ချ။

2. ခြေရာခံ နျူကလီယစ်များကို အသက်မသွင်းပါ- ဇီဝနမူနာများတွင် နူကလဲလ်အမျိုးမျိုးရှိပြီး၊ပတ်ဝန်းကျင်။Poly A သည် ထုတ်ယူခြင်း သို့မဟုတ် ထိန်းသိမ်းခြင်း အဆင့်များတွင် ခြေရာခံ နျူကလီးယားများကို အသက်မသွင်းနိုင်ပါ။ပစ်မှတ် nucleic acids များ၏ အထွက်နှုန်းနှင့် တည်ငြိမ်မှုကို တိုးတက်စေသည်။

3. Coprecipitation- အရက်ကို ဖျန်ဖြေပေးသော မိုးရွာသွန်းခြင်း သို့မဟုတ် ပေါင်းစပ်ခြင်း၏ နျူကလိစ်အက်ဆစ် သန့်စင်ခြင်း အဆင့်တွင်၊ poly A သည် ပစ်မှတ်နျူကလိစ်အက်ဆစ်နှင့် ပေါင်းစည်းနိုင်သည် သို့မဟုတ် ပိုလီမာအမှုန်များအဖြစ် ဖွဲ့စည်းနိုင်သည်ပြန်လည်နာလန်ထူတိုးတက်စေ။

အသုံးပြုမှုနည်းလမ်း

သင့်လျော်သော lyophilized အမှုန့်ပမာဏကိုယူပါ၊ DEPC သန့်စင်ထားသောရေ သို့မဟုတ် ဂွာနီဒင်းဆားရည်ကိုထည့်ပါ။၎င်းကို 0.1-1ug/uL တွင် အရည်ဖျော်ပြီး ခွဲထုပ်ပြီး -20°C တွင် သိမ်းဆည်းပါ။

လျှောက်လွှာများ

1.Virus DNA/RNA ထုတ်ယူခြင်း- 1-5ug Carrier RNA ကို lysate သို့ ပေါင်းထည့်ခြင်းသည် RNA/DNA ၏ အထွက်နှုန်းကို တိုးတက်စေပြီး ပစ်မှတ်နျူကလိစ်အက်ဆစ်ကို တည်ငြိမ်စေပြီး သိုလှောင်မှုအတွင်း သန့်စင်ထားသော နျူကလိစ်အက်ဆစ်၏ ပျက်စီးယိုယွင်းမှုကို ရှောင်ရှားနိုင်သည်။

2. ကော်လံအမြှေးပါးနည်းလမ်း (<1ug) ဖြင့် micro DNA/RNA ထုတ်ယူမှုတွင်၊ carrier RNA 1-5ug သို့ထည့်ခြင်းသည် nucleic acid ၏အထွက်နှုန်းကို တိုးတက်စေရန်အတွက် အထောက်အကူဖြစ်စေပါသည်။

3. အရက်ကို ဖျန်ဖြေပေးသော nucleic acid မိုးရွာသွန်းမှုနှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုအဆင့်တွင်၊ 1-2ug carrier RNA သည် အပိုင်းတို RNA ၏ ပြန်လည်ကောင်းမွန်လာစေရန် အထောက်အကူဖြစ်စေပါသည်။

4. quantitative probe PCR တုံ့ပြန်မှုဖြေရှင်းချက်တွင်၊ တုံ့ပြန်မှုဖြေရှင်းချက်တွင် 10-100ng carrier RNA ပေါင်းထည့်ခြင်းသည် sensitivity ကိုတိုးတက်စေပြီး C ကိုလျှော့ချရန် အထောက်အကူဖြစ်စေသည်။_Tတန်ဖိုး။