Robustart Taq DNA Polymerase

Robustart Taq DNA Polymerase သည် စတင်ပူပြင်းသော DNA polymerase တစ်ခုဖြစ်သည်။ဤထုတ်ကုန်သည် PCR စနစ်ပြင်ဆင်မှုနှင့် ချဲ့ထွင်မှုလုပ်ငန်းစဉ်တွင် တိကျသောမဟုတ်သော primer သို့မဟုတ် primer ပေါင်းစည်းခြင်းကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာသော တိကျသောမဟုတ်သောတုံ့ပြန်မှုကို ပိုမိုကောင်းမွန်စွာတားဆီးနိုင်ရုံသာမကပါ။ထို့ကြောင့်၊ ၎င်းသည် အထူးကောင်းမွန်သော တိကျမှုရှိပြီး အာရုံစူးစိုက်မှုနည်းသော ပုံစံများကို ချဲ့ထွင်ရန်အတွက် ပိုမိုထိရောက်သည်၊ ၎င်းသည် multiplexed PCR amplification တုံ့ပြန်မှုအတွက် သင့်လျော်သည်။ထို့အပြင်၊ ဤထုတ်ကုန်သည် အလွန်ကောင်းမွန်သောအသုံးချနိုင်မှုရှိပြီး တည်ငြိမ်သောချဲ့ထွင်မှုရလဒ်များကို PCR တုံ့ပြန်မှုအမျိုးအစားအမျိုးမျိုးတွင် ရရှိနိုင်သည်။

အစိတ်အပိုင်းများ

1.5 U/μL Robusstart Taq DNA polymerase

2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ အခမဲ့) (ချန်လှပ်ထားနိုင်သည်)

3.25 mM MgCl₂(ချန်လှပ်ထားနိုင်သည်)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ အခမဲ့) တွင် dNTP နှင့် Mg²+ မပါဝင်ပါ၊ ကျေးဇူးပြု၍ dNTP နှင့် MgCl ကိုထည့်ပါ။₂တုံ့ပြန်မှုစနစ်ပြင်ဆင်သောအခါ။

အကြံပြုထားသော အက်ပ်များ

1.အမြန်ချဲ့ထွင်ခြင်း။

2.ချဲ့ထွင်ခြင်း။

3.သွေး၊ swab နှင့် အခြားနမူနာများကို တိုက်ရိုက်ချဲ့ခြင်း။

4.အသက်ရှုလမ်းကြောင်းဆိုင်ရာရောဂါများရှာဖွေခြင်း။

သိုလှောင်မှုအခြေအနေ

-20°C ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းထားရန်၊ အသုံးမပြုမီ ကောင်းစွာရောစပ်ထားသင့်ပြီး မကြာခဏ အေးခဲနေသော အေးခဲခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။

*အအေးခန်းပြီးနောက် မိုးရွာပါက ပုံမှန်ဖြစ် သည်။ရောစပ်ပြီး အသုံးမပြုမီ အခန်းအပူချိန်နှင့် ညီမျှစေရန် အကြံပြုထားသည်။

ယူနစ်အဓိပ္ပါယ်

တက်ကြွသောယူနစ်တစ်ခု (U) သည် အက်ဆစ်မပျော်ဝင်နိုင်သော 74°C တွင် 10 nmol ၏ deoxyribonucleotide ၏ 10 nmol ပမာဏကို အက်ဆစ်မပျော်ဝင်နိုင်သောပစ္စည်းအဖြစ် activated salmon သုက်ပိုး DNA ကို ပုံစံပလိတ်/primer အဖြစ်အသုံးပြုကာ မိနစ် 30 ကြာ သတ်မှတ်သည်။

အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

1.SDS-PAGE electrophoretic သန့်စင်မှု 98% ထက်ကြီးသည်။

2.ချဲ့ထွင်မှု အာရုံခံနိုင်စွမ်း၊ batch-to-batch ထိန်းချုပ်မှု၊ တည်ငြိမ်မှု။

3.exogenous nuclease လုပ်ဆောင်ချက်မရှိ၊ exogenous endonuclease သို့မဟုတ် exonuclease ညစ်ညမ်းမှု မရှိခြင်း။

ညွှန်ကြားချက်များ

တုံ့ပြန်မှု စနစ်ထည့်သွင်းခြင်း။

မှတ်စုများ-

1) a.ကြားခံတွင် dNTP နှင့် Mg²+ မပါဝင်ပါ၊ ကျေးဇူးပြု၍ dNTP နှင့် MgCl တို့ကို ထည့်ပါ₂တုံ့ပြန်မှုစနစ်ပြင်ဆင်သောအခါ။

၂) ခ။qPCR/qRT-PCR တွင်အသုံးပြုပါက၊ fluorescent probes များကို တုံ့ပြန်မှုစနစ်တွင် ထည့်သွင်းသင့်သည်။အများအားဖြင့်၊ နောက်ဆုံး primer အာရုံစူးစိုက်မှု 0.2 μM သည် ကောင်းမွန်သောရလဒ်များကိုပေးလိမ့်မည်။တုံ့ပြန်မှုစွမ်းဆောင်ရည်ညံ့လျှင် primer အာရုံစူးစိုက်မှုကို 0.2-1 μM အကွာအဝေးတွင်ချိန်ညှိနိုင်သည်။probe အာရုံစူးစိုက်မှုကို အများအားဖြင့် 0.1-0.3 μM အကွာအဝေးတွင် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်ထားသည်။primer နှင့် probe ၏ အကောင်းဆုံးပေါင်းစပ်မှုကို ရှာဖွေရန် အာရုံစူးစိုက်မှု gradient စမ်းသပ်မှုများကို လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။

အပူစက်ဘီးစီးခြင်း ပရိုတိုကော

မှတ်စုများ

1.လျင်မြန်သော DNA polymerase ၏ ချဲ့ထွင်မှုနှုန်းသည် 1 kb/10 s ထက် မနည်းသင့်ပါ။မတူညီသော PCR တူရိယာများ၏ အပူချိန်မြင့်တက်မှုနှင့် ကျဆင်းမှုနှုန်း၊ အပူချိန်ထိန်းချုပ်မှုမုဒ်နှင့် ကွဲပြားခြားနားသော PCR တူရိယာများ၏ အပူစီးဆင်းမှုထိရောက်မှု အလွန်ကွာခြားသောကြောင့် တိကျသောအမြန် PCR တူရိယာအတွက် အကောင်းဆုံးတုံ့ပြန်မှုအခြေအနေများကို အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။

2.စနစ်သည် အလွန်လိုက်လျောညီထွေရှိသော၊ ပိုမိုတိကျမှုနှင့် အာရုံခံနိုင်စွမ်းရှိသည်။

3.မြင့်မားသော sensitivity PCR ထောက်လှမ်းမှု ဓါတ်ပစ္စည်းများအဖြစ် အသုံးပြုရန် သင့်လျော်ပြီး multiplex PCR amplification တုံ့ပြန်မှုများတွင် အသုံးပြုနိုင်သည်။

4.5′→3′ ပိုလီမာနေးလုပ်ဆောင်ချက်၊ 5′→3′ exonuclease လုပ်ဆောင်ချက်၊မရှိ 3′→5′ exonuclease လှုပ်ရှားမှု;proofreading function မရှိပါ။

5.PCR နှင့် RT-PCR ၏ အရည်အသွေးနှင့် အရေအတွက် စမ်းသပ်ခြင်းအတွက် သင့်လျော်သည်။

6.PCR ထုတ်ကုန်၏ 3′ အဆုံးသည် A ဖြစ်ပြီး၊ ၎င်းသည် T vector သို့ တိုက်ရိုက်ပုံတူပွားနိုင်သည်။

7.အဆင့်သုံးဆင့်နည်းလမ်းကို အနွေးဓာတ်နည်းသော အပူချိန်ရှိသော primer များအတွက် သို့မဟုတ် 200 bp ထက် ပိုရှည်သော အပိုင်းအစများကို ချဲ့ထွင်ရန်အတွက် အကြံပြုထားသည်။