Multiplex One Step RT-qPCR Premix-UNG
ကြောင်နံပါတ်- HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) သည် ပုံစံပလိတ်အဖြစ် RNA ကိုအခြေခံထားသော multiplex quantitative PCR kit တစ်ခုဖြစ်သည်။စမ်းသပ်မှုလုပ်ငန်းစဉ်တွင်၊ ပြောင်းပြန်ကူးယူဖော်ပြခြင်းနှင့် အရေအတွက် PCR တို့ကို တူညီသောပြွန်တွင်ပြုလုပ်ခဲ့ပြီး၊ စမ်းသပ်လည်ပတ်မှုကို ရိုးရှင်းစေပြီး ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ကို လျှော့ချပေးသည်။ဤကိရိယာအစုံတွင်၊ ပထမကြိုးမျှင် cDNA ကို အပူဒဏ်ခံနိုင်ရည်ရှိသော Reverse Transcriptase ဖြင့် ထိရောက်စွာပေါင်းစပ်ပြီး HotStart Tag DNA Polymerase ဖြင့် အရေအတွက် ချဲ့ထွင်ထားသည်။အစုံလိုက်တွင် အဓိကအားဖြင့် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ထားသော MP ကြားခံ၊ အင်ဇိုင်းများ ရောနှောပါဝင်သည် စသည်တို့ ပါဝင်ပါသည်။ ကြားခံဖြေရှင်းချက်တွင် Mg ပါရှိပြီး၊2+နှင့် dNTPထို့အပြင်၊ သီးခြားမဟုတ်သော PCR ချဲ့ထွင်မှုကို ထိထိရောက်ရောက် တားစီးနိုင်ပြီး qPCR တုံ့ပြန်မှုအများအပြား၏ ချဲ့ထွင်မှုစွမ်းဆောင်ရည်ကို မြှင့်တင်နိုင်သည့်အချက်များ ထည့်သွင်းထားသည်၊ ၎င်းသည် ချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုနှင့် ချဲ့ထွင်မှုများစွာအထိ လုပ်ဆောင်နိုင်စေမည့် အချက်များဖြစ်သည်။aerosol ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ကို ထိထိရောက်ရောက်ကာကွယ်ရန် dUTP/UDG စနစ်အား ထည့်သွင်းထားသည်။
အစိတ်အပိုင်းများ
1. ကြားခံ
2. Enzyme ရောမွှေပါ။
သတ်မှတ်ချက်
| ဟော့စတင် | Built-in hot start |
| ထောက်လှမ်းနည်း | Primer-probe ထောက်လှမ်းခြင်း။ |
| PCR နည်းလမ်း | အဆင့်တစ်ဆင့် RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| နမူနာအမျိုးအစား | DNA |
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
ထုတ်ကုန်ကို ရေခဲခြောက်ဖြင့် ပို့ဆောင်ထားပြီး -25 ~ 15 ℃ ဖြင့် ၁ နှစ်ကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။မကြာခဏ ရှောင်သင့်ပါတယ်။အေးခဲ-ဖြူး။သီးခြားသိမ်းဆည်းရန် အကြံပြုထားသည်။
ညွှန်ကြားချက်များ
1.တုံ့ပြန်ခြင်း။ စနစ်
| အစိတ်အပိုင်းများ | ထုထည် (μL) | နောက်ဆုံး အာရုံစူးစိုက်မှု |
| 2 × MP Buffer | ၁၂.၅ | 1× |
| အင်ဇိုင်းရောနှောခြင်း။ | 1 | - |
| Primer/Probe ရောနှော (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| နမူနာပုံစံ RNA | ၁-၁၀ | - |
| RNase အခမဲ့ H2O | 25 သို့ | - |
မှတ်စုများ-
အသုံးမပြုမီ သေချာရောမွှေပါ၊ ပြင်းထန်သော တုန်ခါမှုကြောင့် ဖြစ်ရသည့် အလွန်အကျွံပူဖောင်းများကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။
aPrimer အာရုံစူးစိုက်မှု- အခြေအနေပေါ်မူတည်၍ multiplex primer အပါအဝင် primer ရောနှောမှု အကောင်းဆုံး primer အာရုံစူးစိုက်မှု 0.l နှင့် 1.0μM ကြားရှိနိုင်သည်။
ခProbe အာရုံစူးစိုက်မှု- အခြေအနေပေါ်မူတည်၍ multiplex probe labeling ခြားနားချက် fluorescent group အပါအဝင် Probe mix သည် အကောင်းဆုံး probe concentration 0.05 နှင့် 0.5μM ကြားရှိနိုင်သည်။
ဂ။နမူနာပုံစံကို ပျော့ပြောင်းခြင်း- qPCR သည် အလွန်ထိခိုက်လွယ်ပြီး ပုံစံပလိတ်ကို မှေးမှိန်ရန် အကြံပြုထားသည်။ထိန်းချုပ်မှု Ct တန်ဖိုးသည် 20 နှင့် 35 ကြား သင့်လျော်သည်။
ဃ။စနစ်ပြင်ဆင်မှု- အလွန်သန့်ရှင်းသော အလုပ်စားပွဲတွင် ကျေးဇူးပြု၍ နျူကလီးယားအကြွင်းအကျန်မရှိဘဲ ပိုက်ပိုက်နှင့် တုံ့ပြန်မှုပြွန်ကို ပြင်ဆင်ပါ။ဇကာဒြပ်စင်ပါသော သေနတ်ခေါင်းကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။ဖြတ်ကျော်ညစ်ညမ်းမှုနှင့် aerosol ညစ်ညမ်းမှုကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။
2. အကောင်းဆုံးစက်ဘီးစီးခြင်း။ပရိုတိုကော
| သံသရာ ခြေလှမ်း | အပူချိန် | အချိန် | ဟုတ်ရဲ့လား။ |
| စာသားပြောင်းပြန် | 50 ℃a | မိနစ် 20 | 1 |
| ကနဦး-အသွင်အပြင် | 95 ℃ | ၅ မိနစ် | 1 |
| ချဲ့ထွင်တုံ့ပြန်မှု | 95 ℃ | 15 စက္ကန့် |
၄၀-၄၅ |
| 60 ℃ b | 30 စက္ကန့် c |
မှတ်စုများ-
aပြောင်းပြန်စာသား- အပူချိန်သည် 42°C သို့မဟုတ် 50°C ကို ရွေးချယ်နိုင်သည်။
ခချဲ့ထွင်မှုတုံ့ပြန်မှု- ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသော primers များ၏ Tm တန်ဖိုးအရ အပူချိန်ကို ချိန်ညှိသည်။
ဂ။Fluorescence အချက်ပြရယူမှု- ကိရိယာလက်စွဲ၏ လိုအပ်ချက်များနှင့်အညီ စမ်းသပ်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို သတ်မှတ်ပေးပါ။
မှတ်စုများ
သင့်ကျန်းမာရေးနှင့် ဘေးကင်းစေရန်အတွက် လိုအပ်သော PPE၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီနှင့် လက်အိတ်များ ဝတ်ဆင်ပါ။
