ဗိုင်းရပ်စ် DNA/RNA ထုတ်ယူခြင်းကိရိယာ
ဤကိရိယာသည် nasopharyngeal swabs၊ ပတ်ဝန်းကျင် swabs၊ cell culture supernatants နှင့် tissue homogenate supernatants ကဲ့သို့သော နမူနာများမှ မြင့်မားသောသန့်ရှင်းစင်ကြယ်သော ဗိုင်းရပ်စ် DNA/RNA ကို အမြန်ထုတ်ယူရန်အတွက် သင့်လျော်ပါသည်။ပစ္စည်းကိရိယာသည် အရည်အသွေးမြင့် ဗိုင်းရပ်စ် DNA/RNA ထုတ်ယူရန်အတွက် phenol/chloroform အော်ဂဲနစ်အပျော်ရည်များ သို့မဟုတ် အချိန်ကုန်သော အရက်မိုးရွာခြင်းကို ဖယ်ရှားပေးသည့် ဆီလီကာအမြှေးပါး သန့်စင်သည့်နည်းပညာကို အခြေခံထားသည်။ရရှိသော နျူကလိစ်အက်ဆစ်များသည် အညစ်အကြေးများကင်းစင်ပြီး နောက်ပြန်ကူးယူခြင်း၊ PCR၊ RT-PCR၊ real-time PCR၊ နောက်မျိုးဆက် sequencing (NGS) နှင့် Northern blot ကဲ့သို့သော ရေအောက်စမ်းသပ်မှုများတွင် အသုံးပြုရန် အသင့်ဖြစ်နေပါပြီ။
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
15 ~ 25 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းပြီး အခန်းအပူချိန်တွင် သယ်ယူပါ။
အစိတ်အပိုင်းများ
| အစိတ်အပိုင်းများ | 100RXNS |
| ကြားခံ VL | 50 ml |
| ကြားခံ RW | 120 ml |
| RNase-free ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNA ကော်လံများ | ၁၀၀ |
| စုဆောင်းပိုက်များ (2ml) | ၁၀၀ |
| RNase-free Collection Tubes (1 .5ml) | ၁၀၀ |
ကြားခံ VL-lysis နှင့် binding အတွက်ပတ်ဝန်းကျင်တစ်ခုပေးပါ။
ကြားခံ RW-ကျန်ရှိသော ပရိုတင်းများနှင့် အခြားအညစ်အကြေးများကို ဖယ်ရှားပါ။
RNase-free ddH2O-လှည့်ပတ်ကော်လံရှိ အမြှေးပါးမှ DNA/RNA ကို နှုတ်ယူပါ။
FastPure RNA ကော်လံများ-အထူးသဖြင့် DNA/RNA ကို စုပ်ယူသည်။
Collection Tubes 2 ml-စစ်ထုတ်မှုကို စုဆောင်းပါ။
RNase-free Collection Tubes 1.5 ml-DNA/RNA စုဆောင်းပါ။
လျှောက်လွှာများ
Nasopharyngeal swabs၊ ပတ်ဝန်းကျင် swabs၊ cell culture supernatants၊ နှင့် tissue homogenate supernatants။
ကိုယ်တိုင်ပြင်ဆင်ထားတဲ့ Materအိုင်ယဲလ်များ
RNase-free pipette အကြံပြုချက်များ၊ 1.5 ml RNase-free centrifuge ပြွန်များ၊ centrifuge၊ vortex mixer နှင့် pipettes။
စမ်းသပ်မှု လုပ်ငန်းစဉ်
အောက်ဖော်ပြပါ အဆင့်များအားလုံးကို ဇီဝလုံခြုံမှု ကက်ဘိနက်တွင် လုပ်ဆောင်ပါ။
1. နမူနာမလုံလောက်ပါက RNase-free centrifuge tube တွင် 200 μl (နမူနာမလုံလောက်ပါက PBS သို့မဟုတ် 0.9% NaCl) ဖြင့် Buffer VL 500 μl ကိုထည့်ကာ 15 မှ 30 စက္ကန့်ကြာ vortexing ဖြင့် ကောင်းစွာရောမွှေပြီး centrifuge ပြွန်အောက်ခြေရှိအရောအနှောကိုစုဆောင်းရန်တိုတောင်းပါ။
2. FastPure RNA ကော်လံများကို Collection Tubes 2 ml တွင်ထည့်ပါ။အရောအနှောကို အဆင့် 1 မှ FastPure RNA ကော်လံများသို့ လွှဲပြောင်းပါ၊ 1 မိနစ်ကြာ 12,000 rpm (13,400 × g) တွင် centrifuge လုပ်ပြီး filtrate ကို စွန့်ပစ်ပါ။
3. Buffer RW ၏ 600 μl ကို FastPure RNA ကော်လံများတွင် စက္ကန့် 30 ကြာ 12,000 rpm (13,400 × g) တွင် centrifuge လုပ်ပြီး filtrate ကို စွန့်ပစ်ပါ။
4. အဆင့် 3 ကို ပြန်လုပ်ပါ။
5. အလွတ်ကော်လံကို 12,000 rpm (13,400 × g) တွင် ၂ မိနစ်ကြာ အာရုံစူးစိုက်ပါ။
6. FastPure RNA ကော်လံများကို RNase-free Collection Tubes 1.5 ml (kit တွင် ပေးထားသည့်) အသစ်သို့ ဂရုတစိုက် လွှဲပြောင်းပြီး RNase-free ddH2O 30 – 50 μl ကို အမြှေးပါး၏ အလယ်ဗဟိုသို့ ထည့်ပါ။အခန်းအပူချိန်တွင် 1 မိနစ်ကြာအောင်ထားပြီး 1 မိနစ်ကြာ 12,000 rpm (13,400 × g) တွင် centrifuge ထားပါ။
7. FastPure RNA ကော်လံများကို စွန့်ပစ်ပါ။DNA/RNA ကို နောက်ဆက်တွဲ စစ်ဆေးမှုများအတွက် တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်သည်၊ သို့မဟုတ် -30 ~ -15°C တွင် အချိန်တိုအတွင်း သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည် သို့မဟုတ် -85 ~-65°C ကြာရှည်သောကာလအတွက် အသုံးပြုနိုင်သည်။
မှတ်စုများ
သုတေသနအတွက်သာ အသုံးပြုသည်။ရောဂါရှာဖွေရေးလုပ်ငန်းစဉ်များတွင် အသုံးပြုရန်မဟုတ်ပါ။
1. နမူနာများကို အခန်းအပူချိန်တွင် ကြိုတင်၍ ညီမျှအောင်ပြုလုပ်ပါ။
2. ဗိုင်းရပ်စ်များသည် အလွန်ကူးစက်တတ်ပါသည်။စမ်းသပ်မှုမစမီ လိုအပ်သော ဘေးကင်းရေး ကြိုတင်ကာကွယ်မှုများကို ပြုလုပ်ထားကြောင်း သေချာပါစေ။
3. ထုတ်ယူထားသော ဗိုင်းရပ်စ် DNA/RNA ၏ အထွက်နှုန်းကို ဆုတ်ယုတ်ပျက်စီးစေခြင်း သို့မဟုတ် လျော့ကျစေသောကြောင့် နမူနာကို ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲခြင်းနှင့် ရောချခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။
4. ကိုယ်တိုင်ပြင်ဆင်ထားသော ပစ္စည်းများတွင် RNase-free pipette အကြံပြုချက်များ၊ 1.5 ml RNase-free centrifuge tubes၊ centrifuge၊ vortex mixer နှင့် pipettes များ ပါဝင်သည်။
5. ပစ္စည်းအစုံကိုအသုံးပြုသည့်အခါ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီ၊ တစ်ခါသုံးစေးလက်အိတ်များနှင့် တစ်ခါသုံးမျက်နှာဖုံးများကို ဝတ်ဆင်ပြီး RNase ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ကို လျှော့ချရန် RNase မပါသော စွန့်ပစ်ပစ္စည်းများကို အသုံးပြုပါ။
6. အခြားသတ်မှတ်ထားခြင်းမရှိပါက အခန်းအပူချိန်တွင် အဆင့်များအားလုံးလုပ်ဆောင်ပါ။
ယန္တရားနှင့် အလုပ်အသွားအလာ
