Ultra Nuclease
UltraNuclease သည် Serratia marcescens မှ ဆင်းသက်လာသော မျိုးရိုးဗီဇ အင်ဂျင်နီယာဖြစ်ပြီး DNA သို့မဟုတ် RNA ကို နှစ်ဆ သို့မဟုတ် တစ်ခုတည်းသော သောင်တင်ခြင်း၊ linear သို့မဟုတ် စက်ဝိုင်းပုံ ကျယ်ပြန့်သော အခြေအနေအောက်တွင် 5'-monophosphate oligonucleotides ဖြင့် 5'-monophosphate oligonucleotides ဖြင့် နျူကလိယအက်ဆစ်များကို လုံးလုံးချေဖျက်နိုင်သည် .မျိုးရိုးဗီဇပြုပြင်မွမ်းမံပြီးနောက်၊ ထုတ်ကုန်ကို အချဉ်ဖောက်ခြင်း၊ ထုတ်ဖော်ပြသခြင်းနှင့် သန့်စင်သော Escherichia coli (E. coli) သည် ဆဲလ်အဆီပိုများနှင့် ဆဲလ် lysate သိပ္ပံနည်းကျသုတေသနပြုမှုတို့ကို လျှော့ချပေးသည့်အပြင် သန့်စင်မှုထိရောက်မှုနှင့် ပရိုတင်း၏လုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်းဆိုင်ရာ သုတေသနပြုမှုကိုလည်း တိုးတက်စေသည်။မျိုးဗီဇကုထုံး၊ ဗိုင်းရပ်စ်သန့်စင်ခြင်း၊ ကာကွယ်ဆေးထုတ်လုပ်ခြင်း၊ ပရိုတင်းဓာတ်နှင့် polysaccharide ဆေးဝါးစက်ရုံများတွင် အကြွင်းအကျန် nucleic acid ဖယ်ရှားရေး ဓါတ်ပစ္စည်းများအဖြစ်လည်း အသုံးပြုနိုင်သည်။
ထုတ်ကုန်အင်္ဂါရပ်များ
| CAS နံပါတ် | 9025-65-4 |
| EC နံပါတ် | |
| မော်လီကျူးအလေးချိန် | 30kDa |
| Isoelectric Point | ၆.၈၅ |
| ပရိုတင်း သန့်ရှင်းမှု | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
| သီးခြားလုပ်ဆောင်ချက် | ≥1။1×106U/mg |
| အကောင်းဆုံးအပူချိန် | 37°C |
| အကောင်းဆုံး pH | ၈.၀ |
| Protease လှုပ်ရှားမှု | အနုတ်လက္ခဏာ |
| Bioburden | ＜10CFU/100,000U |
| ကျန်ရှိသော Host-ဆဲလ်ပရိုတင်း | ≤10ppm |
| Heavy Metal | ≤10ppm |
| ဘက်တီးရီးယား Endotoxin | ＜0.25EU/1000U |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCl၊ pH 8.0၊ 2mM MgCl2၊ 20mM NaCl၊ 50% Glycerol |
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
≤0°C သယ်ယူပို့ဆောင်ရေး；-25~-15°C သိုလှောင်မှု၊ သက်တမ်း 2 နှစ် (အေးခဲနေသော ရောနှောခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ)။
ယူနစ်အဓိပ္ပါယ်
37°C တွင် 37°C၊ pH 8.0 တွင် 30min အတွင်း △A260 ၏ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးကို 1.0 ဖြင့် ပြောင်းလဲရန် အသုံးပြုသော အင်ဇိုင်းပမာဏကို oligonucleotides ထဲသို့ ဖြတ်တောက်ခြင်းဖြင့် 37μg salmon သုက်ပိုး DNA ကို ချေဖျက်ပြီး တက်ကြွသော ယူနစ် (U) အဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့သည်။
အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု
ကျန်ရှိသော Host-ဆဲလ်ပရိုတင်း: ELISA အစုံ
•ပရိုတင်း အကြွင်းအကျန်: 250KU/mL UltraNuclease သည် 60 မိနစ်ကြာ အလွှာနှင့် တုံ့ပြန်ခဲ့ပြီး မည်သည့်လှုပ်ရှားမှုကိုမျှ မတွေ့ပါ။
•ဘက်တီးရီးယား EndotoxinLAL-Test၊ တရုတ်ပြည်သူ့သမ္မတနိုင်ငံ အတွဲ ၄ (၂၀၂၀ ထုတ်ဝေမှု) ဂျယ်ကန့်သတ်စမ်းသပ်မှုနည်းလမ်း။အထွေထွေစည်းကမ်းများ (၁၁၄၃)။
•Bioburden- တရုတ်ပြည်သူ့သမ္မတနိုင်ငံ ၏ ဆေးဝါးများ အတွဲ ၄ (၂၀၂၀ ထုတ်ဝေမှု)— အထွေထွေ
Sterility Test အတွက် စည်းမျဉ်းများ (1101)၊ PRC အမျိုးသားစံနှုန်း၊ GB 4789.2-2016။
•အကြီးစားသတ္တု-ICP-AES၊ HJ776-2015။
စစ်ဆင်ရေး
SDS အာရုံစူးစိုက်မှု 0.1% သို့မဟုတ် EDTA ထက်ကျော်လွန်သောအခါ UltraNuclease လုပ်ဆောင်ချက်ကို သိသိသာသာ ဟန့်တားထားသည်။
အာရုံစူးစိုက်မှုမှာ 1mM ထက်ကျော်သည်။Surfactant Triton X- 100၊ Tween 20 နှင့် Tween 80 သည် နျူကလီးယားအပေါ် သက်ရောက်မှုမရှိပါ
အာရုံစူးစိုက်မှု 1.5% အောက်ရှိသောအခါဂုဏ်သတ္တိများ။
| စစ်ဆင်ရေး | အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်ချက် | မှန်ကန်သောလည်ပတ်မှု |
| အပူချိန် | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | ၈.၀-၉.၂ | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2 မီလီမီတာ | 1- 15 မီလီမီတာ |
| DTT | 0- 100 မီလီမီတာ | > 100 မီလီမီတာ |
| 2-Mercaptoethanol | 0- 100 မီလီမီတာ | > 100 မီလီမီတာ |
| Monovalent သတ္တုအိုင်းယွန်း (Na+၊ K+ စသဖြင့်) | 0-20 မီလီမီတာ | 0-200mm |
| PO43- | 0- 10 မီလီမီတာ | 0- 100 မီလီမီတာ |
အသုံးပြုပုံ နှင့် ဆေးပမာဏ
• ကာကွယ်ဆေးထုတ်ကုန်များမှ exogenous nucleic acid ကိုဖယ်ရှားပြီး၊ ကျန်ရှိသော nucleic acid အဆိပ်သင့်မှုအန္တရာယ်ကို လျှော့ချပြီး ထုတ်ကုန်ဘေးကင်းမှုကို မြှင့်တင်ပါ။
• နျူကလိစ်အက်ဆစ်ကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာသော အစာအရည်၏ ပျစ်ဆိမ့်မှုကို လျှော့ချပြီး စီမံဆောင်ရွက်ချိန်ကို တိုစေကာ ပရိုတင်းအထွက်နှုန်းကို တိုးစေသည်။
• အထောက်အကူဖြစ်စေသော အမှုန်အမွှားများ (ဗိုင်းရပ်စ်၊ ပါဝင်သည့်ကိုယ်ထည်စသည်) ကို ထုပ်ပိုးထားသည့် နူကလိစ်အက်ဆစ်ကို ဖယ်ရှားပါ။
အမှုန်အမွှားများကို သန့်စင်ပေးခြင်း၊
| စမ်းသပ်မှုအမျိုးအစား | ပရိုတင်းထုတ်လုပ်မှု | ဗိုင်းရပ်စ်၊ ကာကွယ်ဆေး | ဆဲလ်မူးယစ်ဆေးဝါးများ |
| ဆဲလ်နံပါတ် | 1g ဆဲလ်စိုစွတ်သောအလေးချိန် (10ml ကြားခံဖြင့် ပြန်လည်ရပ်ဆိုင်းထားသည်) | 1L စော်ဖောက်ခြင်း။ အရည် supernatant | 1L ယဉ်ကျေးမှု |
| အနည်းဆုံးဆေးပမာဏ | 250U | 100U | 100U |
| အကြံပြုထားသော ဆေးပမာဏ | 2500U | 25000U | 5000U |
• Nuclease ကုသမှုသည် column chromatography၊ electrophoresis နှင့် blotting analysis အတွက် နမူနာ၏ ကြည်လင်ပြတ်သားမှုနှင့် ပြန်လည်ကောင်းမွန်မှုကို တိုးတက်စေနိုင်သည်။
• မျိုးဗီဇကုထုံးတွင် သန့်စင်ထားသော adeno-ဆက်စပ်ဗိုင်းရပ်စ်များရရှိရန် nucleic acid ကို ဖယ်ရှားသည်။
