နမူနာထုတ် ဓါတ်ငွေ့
နမူနာ ဖြန့်ချိသည့် ဓာတ်ပြုမှုသည် မော်လီကျူး POCT ရောဂါရှာဖွေရေး အခြေအနေများအတွက် ဖြစ်သည်။တိုက်ရိုက်ချဲ့ထွင်ခြင်း LAMP နှင့် direct amplification PCR စနစ်နှစ်ခုအတွက်၊ nucleic acid ထုတ်ယူရန် မလိုအပ်ပါ။နမူနာ၏ အကြမ်းဖျင်း lysate ကို တိုက်ရိုက် ချဲ့ထွင်နိုင်ပြီး ပစ်မှတ် ဗီဇကို တိကျစွာ သိရှိနိုင်သည်၊ နမူနာ ထောက်လှမ်းမှု အချိန်ကို ပိုမိုတိုတောင်းနိုင်သည်၊၊ ၎င်းသည် မော်လီကျူလာ POCT ၏ အသုံးချမှု လိုအပ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။၎င်းသည် nasal swabs၊ throat swab နှင့် အခြားနမူနာအမျိုးအစားများအတွက် သင့်လျော်သည်။စီမံဆောင်ရွက်ထားသောနမူနာများကို အချိန်နှင့်တပြေးညီ fluorescence quantitative PCR သို့မဟုတ် LAMP သိရှိခြင်းအတွက် တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်ပြီး သမားရိုးကျထုတ်ယူမှုနည်းလမ်းများကဲ့သို့ ရှုပ်ထွေးသော nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းများမပါဘဲ ရရှိနိုင်ပါသည်။
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
အခန်းအပူချိန်မှာ သယ်ပြီး သိမ်းဆည်းပါ။
အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု
လုပ်ငန်းဆောင်တာ ထောက်လှမ်းခြင်း – အရေအတွက် qPCR- 800μl နမူနာ ထုတ်လွှတ်မှု ဓာတ်ပြုမှုစနစ်ကို ချဲ့ထွင်ခဲ့သည်
Novel Pseudovirus ကော်ပီ 1000 နှင့်အတူ၊ နှာဆေးနမူနာတစ်ခု၊ ရလဒ်အလားတူ ချဲ့ထွင်မှုမျဉ်းကွေးများနှင့်၊ΔCt တန်ဖိုးများ ± 0.5 Ct အတွင်း
စမ်းသပ်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းres
1. 800 μlနမူနာထုတ်ဆေးရည်ကိုယူ၍ lysis solution ကို 1.5 mL နမူနာပြွန်ထဲသို့ဖြန့်ပါ။
2. nasal swab သို့မဟုတ် လည်ချောင်း swab ကိုယူပြီး၊ nasal swab sampling လုပ်ထုံးလုပ်နည်း- ပိုးသတ်ထားသော swab ကိုယူပြီး နှာခေါင်းထဲသို့ထည့်ကာ 1.5 cm အနက်သို့ ဖြည်းညှင်းစွာတိုး၍ နှာခေါင်း mucosa နှင့် 15 စက္ကန့်ထက်ပို၍ 4 ကြိမ် ညင်သာစွာ လှည့်ပါ။ ထို့နောက် တူညီသော swab ဖြင့် အခြားနှာခေါင်းပေါက်တွင် တူညီသော ခွဲစိတ်မှုကို ပြန်လုပ်ပါ။ လည်ချောင်း စုတ်တံ နမူနာယူခြင်း လုပ်ငန်းစဉ်- ပိုးသတ်ထားသော swab ကိုယူ၍ ညင်သာစွာ ၊ pharyngeal tonsils နှင့် နောက်ဘက် pharyngeal wall ကို 3 ကြိမ် လျင်မြန်စွာ သုတ်ပါ။
၃။ဆပ်ပြာကို နမူနာပြွန်ထဲသို့ ချက်ချင်းထည့်ပါ။နမူနာကို နမူနာပြွန်ထဲတွင် အပြည့်အဝ ဖယ်ထုတ်ကြောင်း သေချာစေရန် ဆပ်ပြာခေါင်းကို သိုလှောင်မှုဖြေရှင်းချက်တွင် အနည်းဆုံး စက္ကန့် 30 ကြာ ရောနှောထားသင့်သည်။
4. အခန်းအပူချိန် (20 ~ 25 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်) တွင် 1 မိနစ်ကြာပေါက်ဖွားပြီး lysis ကြားခံပြင်ဆင်မှုပြီးစီးသည်။
5. 25μl စနစ် RT-PCR နှင့် RT-LAMP နှစ်ခုစလုံးသည် ထောက်လှမ်းစမ်းသပ်မှုများအတွက် 10μl ပမာဏ ပုံစံခွက် ထပ်တိုးမှုနှင့်အတူ လိုက်ဖက်ပါသည်။
မှတ်စုများ
1. တစ်ခုတည်းသော swab နှင့်သက်ဆိုင်သောနမူနာတိုက်ရိုက် lysate အနည်းဆုံးပမာဏကို 400μl သို့ချိန်ညှိနိုင်ပြီး၊ စမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်အရ ချိန်ညှိနိုင်သည်။
2. နမူနာကို နမူနာထုတ်လွှတ်သည့် ဓာတ်ပစ္စည်းများဖြင့် ဆောင်ရွက်ပြီးသည်နှင့်၊ စမ်းသပ်မှု၏ နောက်အဆင့်ကို အမြန်ဆုံး လုပ်ဆောင်ရန် အကြံပြုသည်၊ ကြားကာလ စောင့်ဆိုင်းချိန်သည် ဖြစ်နိုင်ချေ 1 နာရီထက် နည်းပါသည်။
3. နမူနာ lysate ၏ pH သည် အက်စစ်ဓာတ်ဖြစ်ပြီး၊ ထောက်လှမ်းမှုစနစ်တွင် ကြားခံတစ်ခုရှိရန် လိုအပ်သည်။pH ကြားခံဖြင့် PCR၊ RT-PCR နှင့် LAMP fluorescence အများစုအတွက် သင့်လျော်သော်လည်း ကြားခံမပါသော LAMP colorimetric detection အတွက် မသင့်လျော်ပါ။
