2× Rapid Taq Super Mix
ကြောင်နံပါတ်- HCR2016A
2×Rapid Taq Super Mix သည် ခိုင်ခံ့သော တိုးချဲ့မှုအချက်၊ ချဲ့ထွင်မှုအားကောင်းသည့်အချက်နှင့် အထူးကောင်းမွန်သော ချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုတို့ဖြင့် ပြုပြင်ထားသော Taq DNA Polymerase ကို အခြေခံထားသည်။3 kb အတွင်း genome ကဲ့သို့သော ရှုပ်ထွေးသော template များ၏ ချဲ့ထွင်မှုအမြန်နှုန်းသည် 1-3 sec/kb သို့ရောက်ရှိပြီး 5 kb အတွင်း plasmids ကဲ့သို့သော ရိုးရိုးတန်းပလိတ်များသည် 1 sec/kb သို့ရောက်ရှိသည်။ဤထုတ်ကုန်သည် PCR တုံ့ပြန်မှုအချိန်ကို များစွာသက်သာစေနိုင်သည်။တစ်ချိန်တည်းတွင်၊ ရောနှောမှုတွင် primer နှင့် templates များကို ပေါင်းထည့်ခြင်းဖြင့်သာ ချဲ့ထွင်နိုင်သည့် dNTP နှင့် Mg2+ ပါ၀င်သည်၊ ၎င်းသည် စမ်းသပ်မှု၏ လုပ်ဆောင်မှုအဆင့်များကို များစွာရိုးရှင်းစေသည်။ထို့အပြင်၊ ရောနှောချက်တွင် တုံ့ပြန်မှုပြီးနောက် တိုက်ရိုက် electrophoresis ပြုလုပ်နိုင်သည့် electrophoretic indicator dye ပါရှိသည်။ဤထုတ်ကုန်ရှိ အကာအကွယ်အေးဂျင့်သည် ရောနှောမှုကို ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲပြီး ရောနှောပြီးနောက် တည်ငြိမ်သောလုပ်ဆောင်မှုကို ထိန်းသိမ်းစေသည်။PCR ထုတ်ကုန်၏ 3'-end band A သည် T vector သို့ လွယ်ကူစွာ ပွားနိုင်သည်။
အစိတ်အပိုင်းများ
2× Rapid Taq Super Mix
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
PCR Master Mix ထုတ်ကုန်များကို -25~-15℃ တွင် 2 နှစ်ကြာ သိမ်းဆည်းထားသင့်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
| ထုတ်ကုန်သတ်မှတ်ချက် | Rapid Taq Super Mix |
| အာရုံစူးစိုက်မှု | 2× |
| ဟော့စတင် | Built-in Hot Start |
| Overhang | 3′-A |
| တုံ့ပြန်မှုအရှိန် | မြန်သည်။ |
| အရွယ်အစား (နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်) | 15 kb အထိ |
| သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးအခြေအနေများ | ရေခဲခြောက် |
ညွှန်ကြားချက်များ
1. တုံ့ပြန်မှုစနစ် (50 μL)
| အစိတ်အပိုင်းများ | အရွယ်အစား (μL) |
| နမူနာပုံစံ DNA* | သင့်လျော်သည်။ |
| ရှေ့သို့ primer (10 μmol/L) | ၂.၅ |
| ပြောင်းပြန် primer (10 μmol/L) | ၂.၅ |
| 2× Rapid Taq Super Mix | 25 |
| ddH2O | 50 သို့ |
၂။ချဲ့ထွင်မှု ပရိုတိုကော
| သံသရာခြေလှမ်းများ | အပူချိန် (°C) | အချိန် | ဟုတ်ရဲ့လား။ |
| ခေတ်ဟောင်း | 94 | ၃ မိနစ် | 1 |
| Denaturation | 94 | 10 စက္ကန့် |
၂၈-၃၅ |
| ဖြာထွက်ခြင်း။ | 60 | 20 စက္ကန့် | |
| တိုးချဲ့မှု | 72 | 1-10 စက္ကန့်/kb |
မတူညီသော နမူနာပုံစံများကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်-
| ပုံစံခွက်အမျိုးအစား | အပိုင်းအသုံးပြုမှုအပိုင်းအခြား (50 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်) |
| Genomic DNA သို့မဟုတ် E. coli အရည် | 10-1,000 ng |
| ပလတ်စမစ် သို့မဟုတ် ဗိုင်းရပ်စ် DNA | 0.5-50 ng |
| cDNA | 1-5 µL (PCR တုံ့ပြန်မှုစုစုပေါင်းပမာဏ၏ 1/10 ထက်မပိုပါ) |
| မတူညီသော ပုံစံများကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။ | |
မှတ်စုများ-
၁။ဓာတ်ကူပစ္စည်းအသုံးပြုမှု- အသုံးမပြုမီ အပြည့်အဝ ရောနှောပြီး ရောမွှေပါ။
2. Annealing အပူချိန်- annealing temperature သည် universal Tm တန်ဖိုးဖြစ်ပြီး primer Tm တန်ဖိုးထက် 1-2 ℃ ကိုလည်း သတ်မှတ်နိုင်သည်။
3. တိုးချဲ့မှုအမြန်နှုန်း- 1 kb အတွင်း ဂျီနိုမ်နှင့် E. coli ကဲ့သို့သော ရှုပ်ထွေးသောပုံစံများအတွက် 1 စက္ကန့်/ kb သတ်မှတ်ပါ။1-3 kb genome နှင့် E. coli ကဲ့သို့သော ရှုပ်ထွေးသော ပုံစံများအတွက် 3 sec/kb သတ်မှတ်ပါ။3 kb genome နှင့် E. coli ထက်ပိုသော ရှုပ်ထွေးသော နမူနာပုံစံများအတွက် 10 စက္ကန့်/kb သတ်မှတ်ပါ။5 နှင့် 10 kb ကြား plasmid ကဲ့သို့သော ရိုးရှင်းသောပုံစံပလိတ်အတွက် plasmid ထက်နည်းသော 5 kb၊ 5 sec/kb ကဲ့သို့သော ရိုးရိုးတန်းပလိတ်အတွက် 1 sec/kb၊ နှင့် ရိုးရိုးတန်းပလိတ်အတွက် 10 sec/kb၊ 10 kb ထက် ပိုကြီးတဲ့ plasmid လိုမျိုး။
မှတ်စုများ
1. သင့်ဘေးကင်းရေးနှင့် ကျန်းမာရေးအတွက် ကျေးဇူးပြု၍ ခွဲစိတ်ခန်းအတွက် အင်္ကျီများနှင့် တစ်ခါသုံးလက်အိတ်များ ဝတ်ဆင်ပါ။
2. ဤထုတ်ကုန်သည် သုတေသနအတွက်သာ အသုံးပြုပါသည်။
