Warm Start Bst 2.0 DNA Polymerase (Glycerol အခမဲ့)

Bst DNA polymerase V2 ကို Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I မှ ဆင်းသက်လာပြီး 5′→3′ DNA polymerase လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် အားကောင်းသော ကွင်းဆက်အစားထိုး လုပ်ဆောင်ချက် ပါရှိသော်လည်း 5′→3′ exonuclease လုပ်ဆောင်ချက် မရှိပါ။Bst DNA Polymerase V2 သည် ကြိုးမျှင်နေရာပြောင်းခြင်း၊ isothermal amplification LAMP (Loop mediated isothermal amplification) နှင့် လျင်မြန်သော sequencing အတွက် အကောင်းဆုံးသင့်လျော်သည်။Bst DNA polymerase V2 သည် Bst DNA polymerase V2 (HC5005A) ကိုအခြေခံ၍ အခန်းအပူချိန်တွင် DNA polymerase လုပ်ဆောင်ချက်ကို ဟန့်တားနိုင်သည့် Bst DNA polymerase V2 (HC5005A) ပေါ်တွင် အခြေခံထားသည့် hot-start ဗားရှင်းဖြစ်ပြီး၊ ထို့ကြောင့် အခန်းအပူချိန်တွင် DNA polymerase လုပ်ဆောင်ချက်ကို ဟန့်တားနိုင်သောကြောင့် တုံ့ပြန်မှုစနစ်အား အခန်းအပူချိန်တွင် လည်ပတ်ပြီး ပုံဖော်နိုင်သည်။ -specific amplification နှင့် reaction efficiency ကို တိုးတက်စေပြီး၊ ဤဗားရှင်းကို lyophilized လုပ်နိုင်ပါသည်။ထို့အပြင်၊ ၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်ကို မြင့်မားသောအပူချိန်တွင် ထုတ်လွှတ်သောကြောင့် သီးခြားအသက်သွင်းခြင်းအဆင့်ကို ပြုလုပ်ရန်မလိုအပ်ပါ။

အစိတ်အပိုင်းများ

Bst DNA polymerase V2 (Glycerol-free) (8U/μL)

လျှောက်လွှာများ

1.မီးခွက် isothermal amplification

2.DNA ကြိုးမျှင်သည် single displacement တုံ့ပြန်မှု

3.မြင့်မားသော GC မျိုးဗီဇ sequencing

4.နာနိုဂရမ်အဆင့်၏ DNA စီစစ်ခြင်း။

သိုလှောင်မှုအခြေအနေ

သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးသည် 0°C အောက်တွင်ရှိပြီး -25°C~-15°C တွင် သိမ်းဆည်းပါ။

ယူနစ်အဓိပ္ပါယ်

တစ်ယူနစ်ကို 65°C တွင် မိနစ် 30 အတွင်း အက်ဆစ်မပျော်ဝင်နိုင်သော ပစ္စည်းအဖြစ် 25 nmol ၏ dNTP ပေါင်းစပ်သည့် အင်ဇိုင်းပမာဏဟု သတ်မှတ်သည်။

အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

1.ပရိုတင်း သန့်စင်မှု စစ်ဆေးမှု (SDS-PAGE):Bst DNA polymerase V2 ၏ သန့်စင်မှုသည် ≥99% ကို Coomassie Blue ထောက်လှမ်းမှုကို အသုံးပြု၍ SDS-PAGE ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းဖြင့် ဆုံးဖြတ်သည်။

2.Endonucleaseလုပ်ဆောင်ချက်:1 μg λDNA ပါ၀င်သော 50 μL တုံ့ပြန်မှုသည် Bst DNA polymerase V2 ၏ အနည်းဆုံး 8 U ပါ၀င်သော 37 ℃ တွင် 16 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားခြင်းရလဒ်သည် သတ်မှတ်ထားသည့်အတိုင်း ခွဲခြား၍မရပါ။

3.Exonuclease လုပ်ဆောင်ချက်:1 μg λ -Hind Ⅲ ပါဝင်သော Bst DNA polymerase V2 ၏ အနည်းဆုံး 8 U ပါဝင်သော 50 μL တုံ့ပြန်မှုသည် DNA ကို 37 ℃ တွင် 16 နာရီကြာ ချေဖျက်ပေးခြင်းဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည့်အတိုင်း ခွဲခြား၍မရပါ။

4.Nickase လုပ်ဆောင်ချက်:37°C တွင် 1 μg pBR322 DNA ပါရှိသော Bst DNA polymerase V2 ၏ အနည်းဆုံး 8 U ပါဝင်သော 50 μL တုံ့ပြန်မှုတွင် ပေါက်ဖွားခြင်းသည် 37°C တွင် 16 နာရီကြာ ရလဒ်အဖြစ် ခွဲခြား၍မရပါ။

5.RNase လုပ်ဆောင်ချက်:37°C တွင် 1.6 μg MS2 RNA ပါ၀င်သော Bst DNA polymerase V2 ၏ အနည်းဆုံး 8 U ပါဝင်သော 50 μL တုံ့ပြန်မှုတွင် ပေါက်ဖွားခြင်းသည် သတ်မှတ်ချက်အရ ခွဲခြား၍မရသော ပြိုကွဲပျက်စီးမှုကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။

6.E. coliDNA-Bst DNA polymerase V2 ၏ 120 U ကို TaqMan qPCR ဖြင့် E. coli 16S rRNA locus အတွက် သီးသန့် primers ဖြင့် E. coli genomic DNA ပါဝင်မှုကို စစ်ဆေးသည်။E. coli genomic DNA ညစ်ညမ်းမှုသည် ≤1 မိတ္တူဖြစ်သည်။

မီးခွက်တုံ့ပြန်မှု

မှတ်စုများ-

1) a.SYTOTM 16 အစိမ်းရောင် (25×) : စမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်အရ အခြားဆိုးဆေးများကို အစားထိုးအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။

၂) ခ။Primer ရောနှောမှု- 20 µ M FIP၊ 20 µ M BIP၊ 2.5 µ M F3၊ 2.5 µ M B3၊ 5 µ M LF၊ 5 µ M LB နှင့် အခြား volumes များကို ရောစပ်ခြင်းဖြင့် ရရှိသည်။

တုံ့ပြန်မှုနှင့် အခြေအနေ

1 × HC Bst V2 Buffer၊ ပေါက်ဖွားသည့် အပူချိန်သည် 60°C နှင့် 65°C ကြားဖြစ်သည်။

အပူမလှုပ်ရှားခြင်း။

 80°C၊ 20 မိနစ်