လျင်မြန်သောခြေလှမ်းတစ်လှမ်း RT-qPCR Probe Premix-UNG
ကြောင်နံပါတ်- HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) သည် RNA ပုံစံ (ဥပမာ RNA ဗိုင်းရပ်စ်ကဲ့သို့) ကို အသုံးပြု၍ single-plex သို့မဟုတ် multiplex quantitative PCR အတွက် သင့်လျော်သော probe-based RT-qPCR အမြန်ရှာဖွေရေးကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သည်။ဤထုတ်ကုန်သည် ပိုမိုမြန်ဆန်သော ချဲ့ထွင်မှုအမြန်နှုန်း၊ ပိုမိုမြင့်မားသော ချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုနှင့် တိကျမှုရှိသော လျင်မြန်သောအသံချဲ့စက်အတွက် အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်နိုင်သော ကြားခံတစ်ခုပါရှိသော ပဋိပစ္စည်း-မွမ်းမံထားသော Taq DNA Polymerase နှင့် မျိုးဆက်သစ် Reverse Transcriptase ကို အသုံးပြုထားသည်။၎င်းသည် အချိန်တိုအတွင်း အနိမ့်နှင့် မြင့်မားသော အာရုံစူးစိုက်မှုနမူနာများ၏ single-plex နှင့် multiplex နှစ်ခုလုံးတွင် မျှတသော ချဲ့ထွင်မှုကို ပံ့ပိုးပေးသည်။
အစိတ်အပိုင်းများ
1. 5×RT-qPCR ကြားခံ (U+)
2. အင်ဇိုင်းရောနှော (U+)
မှတ်စုများ-
a5×RT-qPCR ကြားခံ (U+) တွင် dNTP နှင့် Mg ပါဝင်သည်။2+;
ခအင်ဇိုင်းရောနှောခြင်း (U+) တွင် ပြောင်းပြန် transcriptase၊ Hot Start Taq DNA polymerase၊ RNase inhibitor နှင့် UDG တို့ ပါဝင်သည်။
ဂ။RNase-Free အကြံပြုချက်များ၊ EP tubes စသည်တို့ကို အသုံးပြုပါ။
အသုံးမပြုမီ 5×RT-qPCR ကြားခံ (U+) ကို သေချာရောမွှေပါ။ဖျော်ပြီးနောက် မိုးရွာပါက ကြားခံကို အခန်းအပူချိန်သို့ ပြန်သွားရန်၊ ရောနှောကာ ပျော်ဝင်ကာ ပုံမှန်အတိုင်း အသုံးပြုပါ။
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ
ထုတ်ကုန်ကို ရေခဲခြောက်ဖြင့် ပို့ဆောင်ထားပြီး -25 ~ 15 ℃ ဖြင့် ၁ နှစ်ကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။
ညွှန်ကြားချက်များ
1. တုံ့ပြန်မှု စနစ်
| အစိတ်အပိုင်းများ | ပမာဏ (20 μL တုံ့ပြန်မှု) |
| 2 ×RT-qPCR ကြားခံ | 4μL |
| အင်ဇိုင်းရောနှော (U+) | 0.8μL |
| Primer ရှေ့သို့ | 0.1~1.0μM |
| Primer ပြောင်းပြန် | 0.1~1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| ပုံစံခွက် | X μL |
| RNase-Free Water | 25μL အထိ |
မှတ်ချက်- တုံ့ပြန်မှုပမာဏမှာ 10-50μL ဖြစ်သည်။
2. စက်ဘီးစီးခြင်းဆိုင်ရာ ပရိုတိုကော (Sဆန်းကြယ်)
| သံသရာ ခြေလှမ်း | အပူချိန် | အချိန် | ဟုတ်ရဲ့လား။ |
| ပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်း | 55 ℃ | ၁၀ မိနစ် | 1 |
| ကနဦးအသွင်အပြင် | 95 ℃ | 30 စက္ကန့် | 1 |
| Denaturation | 95 ℃ | 10 စက္ကန့် | 45 |
| ဖျက်သိမ်းခြင်း/သက်တမ်းတိုးခြင်း။ | 60 ℃ | 30 စက္ကန့် |
| စက်ဘီးစီးခြင်းဆိုင်ရာ ပရိုတိုကော (မြန်) သံသရာ ခြေလှမ်း |
အပူချိန် |
အချိန် |
ဟုတ်ရဲ့လား။ |
| ပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်း | 55 ℃ | ၅ မိနစ် | 1 |
| ကနဦးအသွင်အပြင် | 95 ℃ | ၅ ၎ | 1 |
| Denaturation | 95 ℃ | ၃ ၎ | 43 |
| ဖျက်သိမ်းခြင်း/သက်တမ်းတိုးခြင်း။ | 60 ℃ | 10 s |
မှတ်စုများ-
aReverse transcription temperature သည် 50 ℃ မှ 60 ℃ အကြားတွင် ရှိပြီး အပူချိန် တိုးလာခြင်းသည် ရှုပ်ထွေးသော ဖွဲ့စည်းပုံများနှင့် မြင့်မားသော CG ပါဝင်မှု ပုံစံများကို ချဲ့ထွင်ရန် ကူညီပေးပါသည်။
ခPrimer ၏ Tm တန်ဖိုးအပေါ်အခြေခံ၍ အကောင်းမွန်ဆုံး လိမ်းဆေးအပူချိန်ကို ချိန်ညှိရန်လိုအပ်ပြီး Real Time PCR ကိရိယာကို အခြေခံ၍ fluorescence အချက်ပြစုဆောင်းမှုအတွက် အတိုဆုံးအချိန်ကို ရွေးချယ်ပါ။
မှတ်စုများ
သင့်ကျန်းမာရေးနှင့် ဘေးကင်းစေရန်အတွက် လိုအပ်သော PPE၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီနှင့် လက်အိတ်များကို ဝတ်ဆင်ပါ။
